1. 疏水层析的原理：

        疏水作用层析（Hydrophobic Interaction Chromatography，HIC）是凭证分子外貌疏水性差别来疏散卵白质和多肽等生物大分子的一种较为常用的要领。由于卵白质是一类有序三维结构的活性大分子，但其空间排列很容易受到外界情形的影响，极易从有序的结构酿成无序结构。当立体结构爆发转变时，经常失去原有的活性，即卵白质的失活。使用适度疏水性的疏散介质，在含盐的水溶液系统中，借助于疏散介质与卵白质分子之间的疏水作用抵达吸附活性卵白分子的目的，这种层析手艺称为疏水作用层析。

        卵白质的一级结构中有许多非极性氨基酸，这些氨基酸在三级结构上由于疏水相互作用会被只管包在分子内部，可是仍不可阻止地有一些非极性侧链袒露在外貌，这些非极性的外貌是它和疏水层析介质作用的团结部位。由于卵白质分子的疏水性差别，它们和疏水层析介质的作用力强弱也差别，以是非极性外貌的巨细和含量决议了卵白质分子的疏水性强弱。疏水层析就是使用种种卵白质分子和疏水功效基团之间作用力的差别对卵白质举行疏散、纯化的一种手艺。

        卵白质可以看成是一种有亲水性外壳包裹着疏水性焦点的四级结构的重大系统。卵白质外貌保存一些非极性的疏水基团，这些基团多为非极性的氨基酸残基。由于种种基团疏水性的差别、疏水基团袒露数目的差别、疏水区与亲水区在数目、巨细和漫衍的差别等因素，使种种卵白质之间保存较大的差别，同时，关于统一种卵白质在差别的溶液中，使疏水基团袒露的水平也泛起出一定的差别。由于这种差别，致使种种卵白质分子与统一种疏散介质疏水基团的相互作用差别，吸附能力差别，可以抵达疏散的目的。

        若是在水溶液中加入中性盐，使溶液处于高盐浓度时，可以破损卵白质分子外貌水分子的有序排列，使大分子与疏散介质的功效基团之间爆发疏水作用。同时，由于高盐的保存，使卵白质分子的疏水基团袒露增多，增添了大分子的疏水性，增强了卵白质分子与疏散介质功效基团之间的疏水作用，相互结协力增强。在疏水作用的驱动下，卵白质分子从溶液中被吸附到疏散介质上，改变了卵白质分子在水相与疏散介质相中的分派系数，抵达了吸附的目的。

        在目的产品被疏散介质吸附后，使用低盐含量的溶液通过层析柱，降低了卵白大分子与疏散介质之间的疏水作用，使目的产品脱离疏散介质，扩散到溶液中，抵达洗脱的目的。种种大分子的疏水性强度差别，与疏散介质之间的疏水作用差别，各有用物质凭证疏水性的强弱将依次被洗脱，泛起差别的洗脱峰，抵达多种物质疏散的目的。

2. 疏水层析的优点：

        与卵白质作用条件温顺。疏水作用层析只需改变溶液中的盐含量，就可以举行吸附或洗脱。操作条件温顺，卵白质分子结构无显着转变，卵白质分子活性接纳率高。尤其适用于对情形较量敏感，分子量较大的卵白质的疏散。

        选择性强。在特定盐浓度下，疏水作用层析介质对卵白质的吸附选择性较强，关于疏水性差别的卵白，只要改变洗脱盐的浓度，就可以对卵白实现较好的疏散。

        具有优良的物理、化学稳固性。疏散介质结构稳固，可以有较长的使用寿命，并可恒久重复使用。

        无情形污染。疏水作用层析在操作历程中，只使用盐的水溶液作流动相，除介质的再生外很少使用有机溶剂，因此，不会对情形造成危害，易于工业规模生产。

        易于和其他层析手艺团结使用。疏水作用层析介质易于和其他层析手艺团结使用，可镌汰操作办法，节约生产本钱。适用于含盐量较高，或离子强度较大的溶液中举行卵白质的吸附疏散。